Fiche technique Signal Patch-clamp (analyse électrophysiologique)

Patch-clamp (analyse électrophysiologique)

La version la plus récente de Signal pour Windows intègre de puissantes nouvelles fonctionnalités pour les expériences en configuration " cellule entière " et " canal unique ", qui font de Signal l'outil idéal pour les enregistrements électrophysiologiques. L'utilisation de termes familiers et de protocoles simples à mettre en place pour les besoins courants permet au scientifique d'être rapidement opérationnel. Signal intègre également une fonction d'importation qui vous permet d'analyser des données à partir d'autres systèmes d'enregistrement.

Génération de stimuli

Génération de stimuli sur jusqu'à 8 sorties CNA et 8 lignes TTL
Possibilité de définir jusqu'à 256 ensembles pouvant contenir jusqu'à 500 pulsations chacun.
Réglage des stimuli à un niveau fixe ou relatif à un potentiel de rétention ajustable.
Génération d’états multiples de formes d’onde arbitraires pour chaque balayage. Les formes d’onde sont détenues dans la mémoire du 1401 pour une synchronisation ultra-précise.
Séquencement d'ensembles de pulsations de façon manuelle, cyclique, aléatoire ou selon un protocole défini par l'utilisateur.
Edition, addition et suppression interactives des stimuli en cours d'enregistrement.
Définition des pulsations avec amplitudes et durées fixes ou progressives.
Les types de pulsation incluent : ondes carrées, ondes rampées, sinusoïdes, trains de pulsations et formes d'onde préenregistrées ou générées par l'utilisateur (potentiels d'action enregistrés par exemple).

Assistance à l'échantillonnage pour le patch-clamp

Définition d'un état d'enregistrement particulier à utiliser pour les mesures de résistance de seal et de membrane.
Ajustement simple des potentiels de rétention.
Affichage dynamique de la résistance de seal.
Prise en charge des études de verrouillage dynamique, avec jusqu’à 15 modèles de conductance sélectionnables. Taux d’actualisation jusqu’à 100 kHz sans impulsion transitoire.
L'option d'analyse de membrane affiche les mesures de résistance totale, de conductibilité d'accès et de membrane, de constante de temps de déclin capacitif et de capacitance de membrane.
Affichage des mesures sélectionnées sous forme de graphe temporel

Communication de l'amplificateur

Communication par télégraphe pour régler les échelles de canal en fonction des voltages fournis par un large éventail d'amplificateurs patch-clamp.
Communication directe du logiciel avec Axon Instruments MultiClamp 700A/B. Lecture des valeurs de gain, de réglage de filtre, de capacitance de membrane, de résistance série et de sensibilité de commande externe. Les valeurs lues sont sauvegardées dans le fichier de données Signal.

Soustraction de fuite

3 méthodes de définition des données de fuite
Diverses méthodes de modélisation en ligne pour la soustraction de fuite lors des expériences de verrouillage dynamique
Soustraction en ligne et hors ligne de la trace de fuite mesurée (dont les courants transitoires capacitifs).

Analyse de canal unique
La génération de trace idéalisée convertit la forme d'onde en un ensemble d'événements décrivant l'état du/des canal/canaux au moment de chaque point de transition. Les détails fournis incluent le temps, la durée, l'amplitude moyenne et des fanions signalant les ouvertures/fermetures, la première latence et le niveau.

Visualisation des détails d'événements individuels. Edition des événements en faisant glisser les temps et niveaux avec la souris ou en réglant les valeurs au sein d'un dialogue.
Détection supérieure des événements courts grâce à l’analyse SCAN.
Insertion et suppression interactives d'événements.
Histogrammes d’amplitude produits à partir des données originales.
Histogrammes de temps d’ouverture/fermeture et d’amplitude produits à partir des traces idéalisées.
Evénements d’inclusion/exclusion basés sur les fanions associés.
La génération et l’analyse des traces idéalisées sont disponibles en ligne comme en hors ligne.

Lissages de courbe
Fonctions de lissage mathématique appliquées aux données d'origine ou post-soustraction des fuites et production de tracés de tendance.

Les types de lissage incluent :
- Exponentiel, premier ou second ordre
- Gaussien, un ou deux
- Polynomiaux, du premier au cinquième ordre
- Courbe sigmoïde (Boltzmann)
Donne les meilleurs coefficients de lissage et une estimation de confiance.
Affichage des coefficients de lissage dans les tracés de tendance.

Tracés de tendance
La fonction de tracé de tendance de Signal génère un graphique des mesures prises à partir des données enregistrées en ligne comme hors ligne. Pour chaque trame sélectionnée, les mesures sont effectuées et tracées en tant que coordonnées X et Y. Un exemple typique serait la génération d'une courbe IV.

L'identification des positions pour les mesures peut être effectuée manuellement ou en configurant les curseurs actifs pour la recherche de caractéristiques de données.
Large éventail de mesures disponibles dont : niveaux, temps, coefficients de lissage, surfaces, moyennes, pentes, amplitudes efficaces et écarts types.
Tracé de jusqu'à 32 ensembles de mesures indépendants (avec option d'axes logarithmiques).
Exportation simple des résultats vers une feuille de calcul.

Fonctionnalités avancées

Le séquenceur de sortie offre des fonctions de contrôle avancées, notamment un accès rapide aux données entrantes. Il peut être utilisé de nombreuses manières, par exemple pour générer une rampe de stimuli et stopper la rampe de transition immédiatement après détection d'un potentiel d'action.
Le langage de script permet à l'utilisateur de personnaliser le système en fonction de ses besoins particuliers. Il est utilisé pour l'automatisation et l'addition de fonctions spécifiques n'étant pas disponibles dans les menus (par exemple les routines de soustraction de fuite non-standard). Le contrôle de script peut également permettre d'améliorer les fonctions standard, avec notamment l'option de lissages de courbe de coefficient supérieur